如何检测狗狗体内抗体？
抗体检测是判断动物是否产生免疫应答的重要指标之一，但是不同检测方法所反应机体免疫力的敏感度和特异度不尽相同。目前常用的抗体检测的方法包括中和实验（Neutralization Test， NT）、ELISA 法、竞争ELISA法和胶体金法等[1]。
由于上述几种方法的不同之处，使得它们的适用范围和应用领域也存在一定的差异性。下面就对这几类检测方法的原理、优缺点及在犬、猫抗体检测中的应用进行简单的介绍和比较(图1)。 一、中和试验（NT） 中和试验是一种传统的病毒学诊断技术，具有很高的敏感性和特异性。该法的原理是：将待测样品（血清或血浆）与已知病毒株抗原在体外混合，观察待测体液是否可以抑制病毒的增殖。如果被检样本中的抗体能够和病毒抗原结合并且阻止病毒的感染，则认为被检体液具有一定的中和活性，可以判定其为抗体阳性；反之，则为抗体阴性[2，3]。 优点：该方法操作简单，结果判读直观且可靠性强；
缺点：存在样本量大、检测周期长的缺点，而且受试剂质量以及操作人员技术水平影响较大; 目前多用于检测狂犬病疫苗抗体的水平，对于犬瘟热等其他传染病的疫苗抗体效果不明显。 二、酶联免疫吸附测定（ELISA） ELISA 法是通过抗原-抗体反应而使标记在酶标二抗上的抗体与标本中的抗体结合，再通过底物的显色反应来判断标本中是否存在相应抗体。因此，用酶标仪测定各孔光吸收值便可得出结果[4]。 在宠物临床上，该法的应用广泛。可用于检测血清/血浆、全血、眼结膜拭子和唾液中的犬瘟热病毒（CDV）抗体，也可检测犬细小病毒（CPV）、冠状病毒（CCoV）、传染性肝炎病毒（HBV）等多种病原的抗体水平。但该方法灵敏度较低，有时会出现假阴性的结果。 三、竞争ELISA
竞争ELISA 是酶联免疫吸附测定的一种改良型，其工作原理是将已知浓度的抗体包被到固相载体上作为捕获抗体，然后加入抗原（待测物）以及待测样品，两者通过竞争方式与抗体发生特异性结合。经过洗涤步骤后，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，再经过洗涤即可检测出待测样品中是否存在相应的抗体。通过测定酶标记物吸光度的变化情况进而计算出被检样液中的抗体浓度[5]。 该方法不仅可以避免酶标仪带来的麻烦，而且还降低了酶的用量，减少了操作步骤和时间。 还可以去除掉非特异性的抗体，提高结果的可靠性。 但是需要注意的是，这种方法只能检测到被检样品中有无抗体，而不能区分抗体的类型，不能确定被检者是否真正产生了免疫力还是仅仅接触过病原体而没有产生有效的抗体应答[6]。 四、胶体金试纸条 基于胶体金标记技术的免疫层析试纸条广泛应用于动物传染病早期诊断，主要应用于禽类疫病诊断，近年来也开始应用于犬瘟热等传染病的诊断研究。该方法快速简便，无需特殊仪器设备，检测结果可定性定量分析[7]。 在临床检测中，以被检样品滴加至试纸上，约3~5min后即可观察到一条红色带。根据对照线的颜色深浅确定结果：当对照线完全消失时代表结果为阴性，而当对比线有颜色或者颜色很浅时则表示为阳性结果[8」一些厂家生产的试剂盒还提供双孔检测功能，即同时检测被检样品中的IgM 和 IgG 的抗体含量，为临床诊断提供参考依据。 五、小结 各类型的抗体检测技术在原理和适用范围等方面都存在一定的优势和劣势之处。不同的检测方法有着各自的优缺点，没有最好的检验手段，只有最适合的检测技术选择[9，10]。因此应该根据实际情况进行合理的选择。 各种检测方法均有一定的使用条件范围及要求，因此在实际运用过程中应遵循“缺啥补啥”的原则。在具体应用时应注意以下几点： 1.应根据需要选择合适的检测方法； 2.实验室应配备相关检测设备和试剂； 3.应严格按照说明书要求进行操作和规范处理数据； 4.要注意防止交叉污染的发生。 六、结语 如果被检样本的阳性结果经二次复检确认为阳性，则可考虑接种相应的灭活疫苗或弱毒活疫苗。如果连续两次以上检查结果均为阳性的样本建议立即淘汰。